Zoals het geval is bij het gebruik van een wetenschappelijk instrument, moet u ervoor zorgen dat het instrument in goede staat verkeert voordat u het gebruikt om een monster te analyseren. Als u de respons van het instrument op een bekend monster controleert, wordt gecontroleerd of het instrument correct is gekalibreerd. Spectrofotometers vereisen periodieke kalibratie om een correcte respons van het instrument te garanderen. Infrarood (IR) spectrofotometers gebruiken polystyreen als kalibratiestandaard. Een scan van het instrument met een stuk polystyreen in de monsterhouder zal de aanwezigheid van pieken op de IR-spectra en de relatieve intensiteit van de pieken verifiëren.
Schakel de spectrofotometer in en laat deze minimaal 10 minuten opwarmen. De opwarmtijd is vereist om de bron te stabiliseren. Zonder een stabiele bron kunt u niet vertrouwen op de verkregen spectra. Het analytische signaal berust op verzwakking van de bronstraling door het monster.
Voer de kalibratiestandaard uit door een stuk polystyreenfilm in de monsterhouder te plaatsen. Zonder een testrun met een steekproef van bekende spectra die een standaard wordt genoemd, weet u niet zeker of de spectrofotometer correct werkt.
Haal de spectra op voor het polystyreenmonster. Vergelijk de spectra met die in een standaardreferentie van IR-spectra. Zorg ervoor dat alle verwachte pieken op de testspectra aanwezig zijn. De locatie van de pieken moet op één lijn liggen met de absorptiegolflengte.
Controleer de spectra om er zeker van te zijn dat de sterkte van het signaal binnen 95 procent van het maximum ligt voor de sterkste piek. Als de sterkste piek in de spectra meer of minder is dan de volledige schaal, past u de demping aan om de juiste signaalsterkte te leveren.
Kalibreer de IR-spectrofotometer vaak. Een minimale kalibratiefrequentie moet een scan omvatten net voor en een scan net na uw werk voor de dag.