Volgens het Amerikaanse Environmental Protection Agency wordt LC50 gedefinieerd als de concentratie van een chemische stof in lucht of water die naar verwachting de dood zal veroorzaken bij 50 procent van de proefdieren die in die lucht of water leven. Bij tests die meestal op muizen of ratten worden uitgevoerd, sterft op LC50-niveau 50 procent van de testdieren na één blootstelling. Tests gedaan om LC50-waarden te bepalen, specificeren welk dier in de test wordt gebruikt. Hoewel toxiciteitstests op muizen en ratten niet altijd op mensen van toepassing zijn, is de LC50-waarde belangrijk en wordt deze aan de veilige kant gebruikt wanneer mensen rond het materiaal werken.
Noteer uw testnormen om op te nemen welk dier wordt getest, hoeveel dieren er in elke testgroep zitten, welke concentraties van de chemische stof worden getest en de duur van de blootstelling.
Stel een groep proefdieren bloot aan één concentratie van de chemische stof in een gecontroleerde laboratoriumomgeving. Ga door totdat alle groepen, behalve de controlegroep, worden onderworpen aan een van elke verschillende concentratie van de chemische stof.
Definieer de LC50-waarde als de laagste concentratie van de chemische stof, in delen per miljoen (ppm), waarbij ten minste 50 procent van de proefdieren sterft.