Chemici gebruiken krachtige vloeistofchromatografie of HPLC om mengsels van verbindingen te scheiden. Over het algemeen bestaat de methode uit het injecteren van een monster in een kolom waar het wordt gemengd met een of meer oplosmiddelen. Verschillende verbindingen adsorberen of "plakken" in verschillende mate aan de kolom; en wanneer het oplosmiddel de verbindingen door de kolom duwt, zal een van de componenten van het mengsel eerst de kolom verlaten. Het instrument detecteert de verbindingen wanneer ze de kolom verlaten en produceert een chromatogram dat bestaat uit een grafiek met retentietijd op de x-as en signaalintensiteit van de detector op de y-as. Terwijl de verbindingen de kolom verlaten, produceren ze "pieken" in het chromatogram. In het algemeen geldt dat hoe verder uit elkaar en hoe smaller de pieken in het chromatogram, hoe hoger de resolutie. Wetenschappers beschouwen een resolutie van 1,0 of hoger als een adequate scheiding.
Meet de breedte van twee aangrenzende pieken in het chromatogram door te noteren waar de x-aswaarden zich aan de basis van elke piek bevinden. De x-as vertegenwoordigt de retentietijd, meestal gemeten in seconden. Dus als een piek begint op 15,1 seconden en eindigt op 18,5 seconden, is de breedte (18,5 - 15,1) = 3,4 seconden.
Bepaal de retentietijden door de tijd te noteren, d.w.z. de locatie op de x-as, die overeenkomt met de locaties van de maxima van de pieken. Deze waarde zal normaal ongeveer halverwege liggen tussen de twee waarden die worden gebruikt om de breedte in stap 1 te berekenen. Het voorbeeld dat in stap 1 wordt gegeven, zou bijvoorbeeld een maximum hebben van ongeveer 16,8 seconden.
Bereken de resolutie, R, tussen twee pieken met
R = (RT1 - RT2) /,
waarbij RT1 en RT2 de retentietijden van pieken 1 en 2 voorstellen, en W1 en W2 de breedten van de pieken vertegenwoordigen die aan hun basis zijn genomen. Voortgaand op het voorbeeld van stappen 2 en 3, vertoont één piek een retentietijd van 16,8 seconden en een breedte van 3,4 seconden. Als de tweede piek een retentietijd van 21,4 seconden met een breedte van 3,6 seconden zou vertonen, zou de resolutie dat zijn
R = (21,4 - 16,8) / = 4,6 / 3,5 = 1,3.