Inhoud
Bij biologische reacties werken enzymen net als katalysatoren, waardoor alternatieve paden voor reacties ontstaan en het algehele proces wordt versneld. Een enzym werkt in een substraat en zijn vermogen om de snelheid van de reactie te verhogen hangt af van hoe goed het bindt met het substraat. De Michaelis-constante, aangeduid met KM, is een maat voor enzym / substraataffiniteit. Een kleinere waarde geeft een strakkere binding aan, wat betekent dat de reactie zijn maximale snelheid bereikt bij een lagere concentratie. KM heeft dezelfde eenheden als substraatconcentratie en is gelijk aan de substraatconcentratie wanneer de reactiesnelheid de helft van zijn maximale waarde heeft.
Het plot van Michaelis-Menten
De snelheid van een enzymgekatalyseerde reactie is een functie van substraatconcentratie. Om een plot voor een bepaalde reactie af te leiden, bereiden onderzoekers verschillende monsters substraat in verschillende concentraties voor en registreren ze de snelheid van productvorming voor elk monster. Een grafiek van snelheid (V) versus concentratie () produceert een curve die snel klimt en afvlakt met de maximale snelheid, het punt waarop het enzym zo snel werkt als het kan. Dit wordt een verzadigingsplot of Michaelis-Menten-plot genoemd.
De vergelijking die de Michaelis-Menten-plot definieert is:
V = (Vmax ) ÷ (KM +, deze vergelijking vermindert tot V = Vmax ÷ 2, dus KM is gelijk aan de concentratie van het substraat wanneer de snelheid de helft van zijn maximale waarde is. Dit maakt het theoretisch mogelijk om K te lezenM van de grafiek. Hoewel het mogelijk is om K te lezenM van een Michaelis-Menten-plot, het is niet gemakkelijk of noodzakelijk nauwkeurig. Een alternatief is om de wederkerigheid van de Michaelis-Menten-vergelijking te plotten, die (nadat alle voorwaarden zijn herschikt): 1 / V = {KM/ (Vmax ×)} + (1 / Vmax) Deze vergelijking heeft de vorm y = mx + b, waar Dit is de vergelijking die biochemici normaal gebruiken om K te bepalenM. Ze bereiden verschillende concentraties substraat voor (omdat het een rechte lijn is, ze hebben er technisch gezien slechts twee nodig), plotten de resultaten en lezen KM direct uit de grafiek.Het perceel Lineweaver-Burk