Inhoud
Hoewel ze niet met het blote oog kunnen worden gezien, zijn bacteriën overal. Ze bestaan in voedsel, bodem, water, oppervlakken in onze huizen en in en op ons lichaam. Bacteriën bestaan meestal in gemengde populaties. Isolatie van een specifieke bacterie van andere bacteriesoorten in een bepaald monster stelt microbiologen in staat om de structuur en functie, kenmerken die bij de identificatie worden gebruikt, te bestuderen. Microbiologen isoleren bacteriën vaak met behulp van een van de verschillende strookplaattechnieken.
Hulpmiddelen
Een inoculerende lus wordt gebruikt om micro-organismen over te dragen. Het bestaat uit een nichrome of platinadraad met een kleine, cirkelvormige lus aan het ene uiteinde. Het andere uiteinde is recht en glijdt in een handvat. Plastic wegwerp inoculerende lussen zijn ook beschikbaar. Bacteriën kunnen alleen worden geïsoleerd als ze groeien. Microbiologen kweken bacteriën voor isolatie van strookplaten in ondiepe, ronde petrischalen gevuld met een stevig medium, agar genoemd. Agar bootst de omgeving na waarin de bacteriën van nature groeien. De met media gevulde schalen zijn steriel en hebben deksel om de groei van ongewenste organismen te voorkomen. Tijdens het isoleren van de strook wordt de inoculerende lus herhaaldelijk gesteriliseerd in de vlam van een bunsenbrander.
Beginsel
De strookplaattechniek is de meest populaire methode voor het isoleren van specifieke bacteriën uit een monster dat een mengsel van micro-organismen bevat. De techniek verdunt in wezen het aantal organismen en vermindert hun dichtheid. Hiermee kunnen microbiologen afzonderlijke bacteriekolonies onderscheiden en isoleren. Een kolonie is een zichtbare cluster van bacteriën. Alle bacteriën in een enkele kolonie zijn afkomstig van dezelfde bacteriecel. Bijgevolg zijn individuele kolonies "zuivere" kolonies. De zuivere kolonie wordt overgebracht naar een andere plaat om een zuivere cultuur te produceren die uit één type bacteriën bestaat.
Procedure
Wanneer het op de juiste manier wordt gedaan, verdunt de isolatie van een strook een monster en kunnen afzonderlijke bacteriecellen zich ontwikkelen tot geïsoleerde kolonies. Een microbioloog begint met het steriliseren van de inoculerende lus in een vlam. Ze koelt de lus door deze aan te raken tegen de agar, doopt de lus vervolgens in het monster en spreidt deze heen en weer om een deel van de plaat te bedekken. Ze steriliseert de lus, koelt hem en inoculeert een tweede, aangrenzend deel van de plaat door de lus meerdere keren door het eerste deel te slepen en het tweede deel te bedekken met een zigzagbeweging. Dit pakt een klein aantal bacteriën uit de eerste sectie en brengt ze over naar de tweede sectie. Het aantal keren dat deze basisprocedure wordt herhaald, is afhankelijk van de gebruikte strookplaatmethode. Ondanks de methode wordt het originele monster alleen gebruikt om het eerste deel van de plaat te inoculeren.
Streak Plate-methode
De strookplaatmethoden variëren met het aantal weggeschoten agar-secties. De T-streak-methode maakt gebruik van drie secties: de bovenste helft en twee onderste secties van gelijke grootte. Het initiële inoculum wordt in de bovenste helft van de plaat geplaatst. Bacteriën worden van het bovenste gedeelte naar een van de onderste gedeelten gesleept en vervolgens van dat onderste gedeelte naar het andere. In de kwadrantmethode zijn vier secties van gelijke grootte gestreept. De continue streepmethode omvat typisch het inoculeren van de bovenste helft van de plaat, het 180 graden draaien en de andere helft van de plaat inoculeren zonder de lus te steriliseren of bacteriën uit de vorige sectie te slepen.