Agar is een gelachtige substantie afgeleid van de gezuiverde celwanden van rode algen.Het wordt toegevoegd aan microbiologische media, dit zijn materialen waarop micro-organismen in laboratoria worden gekweekt, om de stof meer een solide structuur te geven. Agar heeft geen voedingswaarde, dus wanneer wetenschappers het gebruiken om micro-organismen te kweken, voegen ze verschillende voedingsstoffen toe om de bacteriegroei in petrischalen of reageerbuizen te vergroten. Wanneer onderzoekers bacteriën in een reageerbuis opslaan, wordt dit een agar-helling genoemd omdat de vloeibare groeimedia vast worden terwijl de buis in een gekantelde positie staat. Een schroefdop op de helling voorkomt dat de agar uitdroogt.
Het medium is anders bereid voor schuine dan petrischalen. Sterilisatie gebeurt met de agar in de buizen; petrischalen worden vooraf gesteriliseerd voordat gesteriliseerde agar erin wordt gegoten. Meet de benodigde hoeveelheid water en doe deze in een Erlenmeyer-kolf. Verwarm het op een fornuis tot het bijna kookt. Voeg indien nodig andere ingrediënten toe en roer het mengsel langzaam en constant tot ze oplossen. Deze ingrediënten kunnen rundsextract, pepton en pH-buffers zijn, afhankelijk van het type micro-organisme dat wordt gekweekt.
Alvorens het gedehydrateerde agar-poeder toe te voegen, meng het met een kleine hoeveelheid koud gedestilleerd water om klonteren te voorkomen. Wees voorzichtig wanneer u agar aan de hete vloeistof toevoegt, omdat deze kan schuimen en de pot kan overlopen. Voeg tegelijkertijd kleine hoeveelheden agar toe en roer om de agar gelijkmatig te verdelen. Zet het vuur uit wanneer het mengsel begint te stomen, voordat het kookt.
Plaats de niet-afgedekte reageerbuisjes op een reageerbuisrek. Vul de reageerbuizen door ongeveer 5 milliliter - ongeveer 0,17 ounce of 1 theelepel - van de gesmolten agar uit de pot over te brengen met behulp van een steriele pipet. Sluit elk van de reageerbuisjes losjes af, omdat de agar niet wordt gesteriliseerd als ze goed worden afgesloten. Steriliseer alle buizen in een autoclaaf gedurende ongeveer 25 minuten bij 121 graden Celsius, of 250 graden Fahrenheit.
Als de agar nog heet is, kantelt u het rek met de reageerbuizen voorzichtig op een stevig oppervlak of een dik boek, waarbij u ervoor zorgt dat het medium in de buizen schuin staat ten opzichte van de reageerbuizen. Laat het medium onder deze hoek afkoelen en stollen, waardoor het oppervlak van de agar groter wordt. Draai de doppen van de reageerbuizen vast nadat de agar is afgekoeld. De hellingen zijn klaar voor gebruik zodra de agar is gestold. Ze kunnen bij kamertemperatuur of in de koelkast worden bewaard voor toekomstig gebruik.
Inoculeer de helling door cellen met een inoculerende lus van een micro-organisme met één kolonie op een plaat over te brengen naar het oppervlak van de helling. Verplaats de lus over het oppervlak van de helling en breng de buizen weer in elkaar. Incubeer de inslag tot er tekenen van groei zijn en plaats de buis in een koelkast.