Inhoud
HPLC (high performance liquid chromatography) en GC (gaschromatografie) zijn beide methoden die wetenschappers gebruiken om monsters te analyseren om te bepalen wat het monster bevat of de concentratie van moleculen in het monster. Beide gebruiken hetzelfde principe, dat zwaardere moleculen langzamer zullen elueren of stromen dan lichtere (polariteit speelt ook een rol in elutietijd). Hoewel het idee hetzelfde is, hebben GC en HPLC verschillende verschillen.
De mobiele fase
De mobiele fase van chromatografische apparatuur is de stof die het monster door de machine beweegt. In HPLC is de mobiele fase een vloeistof bestaande uit een organisch oplosmiddel, ultrazuiver water en andere ingrediënten om de compatibiliteit ervan met het monster te waarborgen. GC gebruikt gas voor zijn mobiele fase. Gassen die worden gebruikt, zijn helium, stikstof, argon of waterstof, afhankelijk van wat wordt geanalyseerd.
De kolommen
Terwijl monsters over chromatografiekolommen reizen, werken het monster en de mobiele fase samen met de inhoud van de kolom waardoor de componenten van het monster op verschillende tijdstippen elueren. HPLC-kolommen zijn meestal vier tot zes centimeter lange metalen of glazen buizen die stevig zijn verpakt met siliciumdioxide of verschillende koolstofkettinglengten. GC-systemen hebben opgerolde capillaire kolommen met binnenwanden bekleed met verschillende materialen, afhankelijk van de behoeften van het laboratorium. Uitgestrekt kunnen GC-kolommen een lengte van 100 voet bereiken.
De voorbeelden
GC wordt gebruikt voor vluchtige verbindingen (die snel afbreken), terwijl HPLC beter is voor minder vluchtige monsters. Als een monster zouten bevat of een lading draagt, moet het worden geanalyseerd met HPLC, niet met GC.
Temperatuurregeling
GC-kolommen bevinden zich in een oven in de machine. Een computer verandert de temperatuur terwijl monsters worden geanalyseerd. Hoe hoger de temperatuur, hoe sneller het monster elueert, maar te hoge temperaturen geven slechte resultaten. HPLC-kolommen worden altijd op een stabiele temperatuur (meestal kamertemperatuur) gehouden.